LABORATORIO #3

LABORATORIO #3

Prueba indirecta de la AGH o Prueba de Coombs indirecta (Prueba de los Ac irregulares).

Propuesta inicialmente para demostrar que algunos pacientes eran portadores de Ac incompletos, evidenciándose con la ayuda de un reactivo antiglobulina. Actualmente, se utiliza para el escrutinio e identificación de Ac irregulares y para la prueba cruzada en el contexto de las pruebas de compatibilidad transfusional. Esta prueba consta de 4 partes:

I.     Sensibilización o incubación. Consiste en poner en contacto con el suero problema con los GR para que se dé la reacción Ag-Ac.

II.    Lavados. Con el objetivo de eliminar todas las Igs inespecíficas que no se hayan fijado a los GR. Es una fase crítica para obtener un resultado correcto. La presencia de Igs residuales (por lavado inadecuado) puede neutralizar al suero AGH y dar un falso negativo.

III.   Fase de la AGH. Se añada el reactivo de AGH después del último lavado para que se fije a los Ac unidos a los GR y termine dándose la aglutinación.

IV.  Control. En las reacciones negativas, sin aglutinación, debe verificarse el resultado añadiendo GRR sensibilizados con Ac IgG. Si el resultado negativo es correcto, la AGH libre producirá la aglutinación de estos GR control. Por el contrario, la ausencia de aglutinación indicara que el suero AGH está en mal estado, tal vez neutralizado, y el resultado de la prueba original no es válida.

Investigación en el trabajo diario de inmunohematología. Fenotipos eritrocitarios y protocolo para encontrar sangre compatible en pacientes con aloanticuerpos antieritrocitarios.

En 1901, en Viena, describió tres tipos distintos de eritrocitos denominándolos O, A y B de acuerdo a la manera de aglutinación y a su frecuencia en el grupo estudiado. En 1903 Alfredo de Castello y Adriano Sutrli descubrieron el cuarto grupo, al que llamaron AB. Posteriormente trabajando con animales de laboratorio descubrieron los grupos sanguíneos M y P1, todos los anteriores con la característica de que sus antígenos eran aglutinados en placas de porcelana por sus correspondientes anticuerpos a los que se les denominó: anticuerpos completos o inmunoglobulinas IgM.

En 1945 Coombs introdujo en la práctica clínica la prueba de la antiglobulina humana obtenidas de sueros de conejos y chivos inmunizados con Inmunoglobulinas humanas; a estas pruebas se les definió como “Coombs Directo” cuando el examen se realizaba sobre los eritrocitos en estudio y “Coombs Indirecto” a la prueba en donde se enfrenta el suero con posibles anticuerpos inesperados frente a eritrocitos de diferentes donadores; en la actualidad a este segundo estudio se le conoce como “Investigación de Anticuerpos Irregulares”. Dacie en 1957 utilizó por primera vez los sueros inmunes con anticomplemento humano (AGH). En nuestros días, los estudios se realizan con sueros monoclonales potentes que contienen una mezcla de esas dos especificidades con la finalidad de detectar tanto las IgG como las fracciones C3-b, C3-d unidos a los antígenos eritrocitarios.

En el transcurso de estos 100 años se han encontrado más de 300 antígenos en los eritrocitos,2 detectados por sus respectivos anticuerpos producidos después de una transfusión o embarazos incompatibles y demostrados por diferentes pruebas de laboratorio: Aglutinación, hemólisis, neutralización; formación de rosetas con monocitos, etc., la mayoría de los anticuerpos encontrados son capaces de destruir los eritrocitos que expresen en su membrana el antígeno correspondiente.

Los antígenos eritrocitarios se han podido agrupar en 29 sistemas de acuerdo a sus características bioquímicas, fisicoquímicas y su codificación genética. Se heredan de acuerdo a las leyes mendelianas. Hay algunos antígenos que no han podido ser clasificados correctamente por lo que se les ha colocado tentativamente en el grupo de las colecciones y series mientras se demuestra su clasificación exacta para ser incluidos en los sistemas conocidos o si pertenecen a nuevos sistemas que hasta ahora se desconocen.

La mayoría de los bancos de sangre se conforman, con proporcionar sangre compatible para los Antígenos ABO y Rho(D) como si estuviéramos en la década de 1950, aduciendo que éstos son los antígenos que producen las reacciones transfusionales más severas, sin embargo hay muchas reacciones que aparentemente pasan inadvertidas para el clínico en las 4 horas posteriores a la transfusión, período en el que se tiene una vigilancia más estrecha en el paciente, pero los anticuerpos implicados en muchas reacciones tardías son capaces de hemolizar los eritrocitos incompatibles después de 12, 24 o hasta 72 horas de realizada la transfusión, llevando incluso a la muerte al paciente cuando la hemólisis es intravascular, sin que se llegue a sospechar que la causa fue una reacción transfusional de este tipo, como puede suceder con anticuerpos: Anti Duffya, anti Duffy-b, anti Duffy-ab, anti-Kidd-a, anti Kidd-b, anti-Vel y algunas variantes de anti-P, activos a 37° C.

Protocolo básico para encontrar sangre compatible en los pacientes y una serie de protocolos colaterales, que se suman a este principal, dependiendo de las características de cada paciente y de los anticuerpos inesperados encontrados en el estudio básico.

Protocolo principal.

I.      Para los pacientes ambulatorios que acuden a transfundirse al Banco Central de Sangre y que no tienen datos sugestivos de una reacción transfusional previa, o que no presentan anticuerpos irregulares antieritrocitos. En todos los casos el médico del propio banco de sangre que es el primer contacto, realiza una historia clínica que envía al laboratorio de inmunohematología para que el personal de dicha área decida el abordaje de estudio de cada paciente.

Se toma muestra sanguínea que consta de un tubo con 4 mL. de sangre con E.D.T.A. y otro con 7 mL de sangre sin anticoagulante
En el laboratorio se separa el suero de la sangre coagulada inmediatamente después de retraído el coágulo y de la muestra con E.D.T.A. se corroboran los datos de Hemoglobina, Hematocrito y cuenta de plaquetas.
Los estudios que se realizan son: Grupo ABO directo e inverso, Rho(D), prueba de escrutinio (tamizaje) de anticuerpos antieritrocitos y las pruebas de compatibilidad con técnica salina rápida, a 37° C y en la fase de Coombs. Se completa el estudio con pruebas cruzadas mayores en técnica de gel.

En los casos en que se encuentran aglutinaciones inesperadas en alguna de las pruebas se utilizan los protocolos colaterales para definir la especificidad de esos anticuerpos irregulares:

a) Si en el tamizaje hay alguna aglutinación se realiza el estudio de anticuerpos irregulares con todo el panel de eritrocitos de fenotipo conocido, primero con las del Panel Mestizo Mexicano que nosotros producimos cada 40 días y si es necesario se completa la información con paneles comerciales de Estados Unidos y España.
b) Se realiza el fenotipo eritrocitario del paciente para comprobar la especificidad del anticuerpo encontrado y para definir otros posibles riesgos en transfusiones futuras.
c) Se busca en la sangre por transfundir el antígeno implicado para tener la certeza de transfundir sangre compatible por prueba cruzada y fenotipo. En muchas ocasiones las pruebas de compatibilidad pretransfusional son compatibles y detectamos un anticuerpo irregular por el tamizaje de anticuerpos, demostrándose después con los fenotipos que la sangre a transfundir carecía delantígeno implicado.
d) Cuando el autocontrol de paciente es positivo, se realiza prueba de Coombs directo con diluciones y Coombs específico para saber si se trata de una IgG, de complemento o de ambos, unidos a los eritrocitos del paciente. Con la historia clínica y en particular con la historia transfusional, se puede inferir si se trata o de un autoanticuerpo y de probables aloanticuerpos por transfusiones incompatibles previas de eritrocitos y que fueron transfundidos recientemente.
En estos casos se realiza despegado de anticuerpos de los eritrocitos para conocer su especificidad. Esto puede hacerse con éter, tricloro etileno más coloroformo o con glicina a pH ácido.
e) Si se detectan mezclas de anticuerpos o panaglutinaciones al realizar la investigación de anticuerpos irregulares entonces se hacen adsorciones y elusiones con eritrocitos de diferentes fenotipos: R1R1, R2R2, rr, Fya negativos, Jka negativos, etc. para demostrar por separado las especificidades de los anticuerpos irregulares implicados. Para estos casos es de mucha ayuda conocer el fenotipo eritrocitario del paciente con el mayor número posible de antígenos.
f) También se pueden utilizar titulaciones de los anticuerpos encontrados en el suero del paciente, sobre todo cuando nos enfrentamos a autoanticuerpos y queremos saber si se encuentran aloanticuerpos enmascarados por los anteriores.

II.     En las muestras sanguíneas de pacientes, referidas de los diferentes hospitales para ser estudiadas y encontrar sangre compatible en el laboratorio del Banco Central de Sangre, se inicia con los mismos estudios de los pacientes ambulatorios, con la diferencia de que en estos casos la investigación de anticuerpos se realiza directamente con el panel completo de eritrocitos de fenotipo eritrocitario conocido, por lo demás, los protocolos colaterales se realizan de acuerdo a los resultados encontrados en la primera etapa.

III.    En los estudios iniciales de protocolo de Trasplante de Médula Ósea, se realizan en el binomio: Receptor y Donador, grupo ABO, Rho(D) fenotipo completo y rastreo de anticuerpos irregulares. Si existe incompatibilidad por el Sistema ABO se realizan titulaciones de aglutininas y hemolisinas implicadas. En la transfusión de concentrados eritrocitarios se transfunden de acuerdo al fenotipo del paciente para seguir posteriormente la evolución del trasplante.

Los datos más importantes solicitados para encontrar sangre compatible, estudios de auto anticuerpos en anemia hemolítica autoinmune, reacción postransfusional o investigación de anticuerpos en la enfermedad hemolítica del recién nacido por alo anticuerpos son: Diagnóstico de fondo, historia transfusional que incluye el número aproximado de productos transfundidos, la fecha de última transfusión de eritrocitos y la cantidad transfundida en los últimos 2 meses, datos de algún tipo de reacción en el transcurso del evento transfusional, de qué tipo, a qué producto y tratamiento aplicado en esa ocasión, cuáles fueron los resultados de estudios realizados en las transfusiones previas; tratamientos médicos recibidos en el último mes; además en las mujeres es necesario informar la historia gíneco-obstétrica.

En el laboratorio del Banco Central de Sangre del Centro Médico Nacional Siglo XXI, reciben en un año aproximadamente, 3,000 solicitudes de transfusión de concentrados eritrocitarios para pacientes con características diferentes:

1. De las personas que acuden al Servicio de Transfusiones del Banco, 87% corresponde a pacientes ambulatorios, generalmente sin problemas en transfusiones previas. De estos pacientes, 4 % se les detecta algún anticuerpo inesperado, por lo que pasan al grupo de pacientes que necesitan sangre con un fenotipo específico además de su compatibilidad por el sistema ABO y del antígeno Rho(D).

Los siguientes grupos representan 13% de los estudios realizados.

2. Solicitudes de concentrados eritrocitarios especiales para pacientes internados en los Hospitales del I.M.S.S. que tienen alguna reacción transfusional o en los que se detectan anticuerpos inesperados al realizarles las pruebas pretransfusionales.
3. Estudios de inmunización materno fetal, como control prenatal o posterior al parto en recién nacidos afectados por posibles alo anticuerpos.
4. Investigación de autoanticuerpos propiciadores de anemia hemolítica autoinmune.
5. Investigación de anticuerpos producidos por medicamentos
6. Estudios previos al trasplante de médula ósea en el paciente y el donador implicados y sangre compatible en pacientes ya trasplantados.

Para cubrir esta demanda es necesario estudiar en los pacientes los anticuerpos irregulares potencialmente peligrosos, así como los grupos sanguíneos más importantes de los 29 sistemas conocidos, por lo general son 25 grupos sanguíneos los que con mayor frecuencia estudiamos en nuestra población, en ese grupo se detecta 99% de los problemas transfusionales, inmunización materno-fetal y los autoanticuerpos de las anemias hemolíticas autoinmunes.

PRUEBAS

Prueba cruzada mayor:

Para la prueba cruzada mayor se hacen innecesarios procedimientos laboriosos de lavado, ya que la suspensión de eritrocitos se añade al micro-pozo antes del plasma o suero, con lo que crea una barrera sobre la suspensión de gel e impide la neutralización del AGH (Antiglobulina humana) por la proteína IgG del suero o plasma.

Realice la prueba cruzada mayor a los siguientes pacientes: politransfundidos (más de 10 unidades de glóbulos rojos), con síndromes mieloploriferativos, mielodisplásicos, anemia falciforme, anemia en estudio, enfermedad renal crónica y a pacientes con RAI positivo, recuerde realizar por duplicado la prueba cruzada mayor a pacientes con RAI positivo.

Procedimiento:

·         Marque los pozos correspondientes a 6 pacientes con el nombre o número del paciente y número de unidad a cruzar.

·         No utilice tarjetas que presenten signos de desecación o burbujas o cuyos cierres no estén intactos.

·         Realice dilución de hematíes (unidad-donante) al 1% (1000ul de solución Liss y 10ul de glóbulos rojos).

·         Dispense 50ul de la dilución al 1% en cada pozo. (de la unidad-donante)

·         Dispense 25ul del suero o plasma del paciente.

·         Incubar entre 10 y 15 minutos a 37­⁰ C

·         Centrifugar 10 minutos

·         Leer interpretar reacción de aglutinación (Banjo). 

·         Una reacción negativa indica compatibilidad de la sangre del donante con el receptor.

·         Una reacción positiva indica incompatibilidad de la sangre del donante con el receptor, debido a la presencia de anticuerpos dirigidos contra los antígenos existentes en los eritrocitos del donante

Rastreo de Anticuerpos (RAI):

Reactivos e insumos:

·         Tarjeta/ID-Card Liss coombs (AGH poliespecífica. Coombs Anti-IgG+C3d)

·         Puntas

·         Pipetas

·         Células de escrutinio: Células I-II (ID-DiaCell I-II)

·         Muestra de pacientes (1,2, 3) en tubo seco o tapa lila (EDTA, CPD-A O heparina).

·         Centrifuga

·         Incubadora

·         Banjo

Procedimiento:

·         Marque los pozos correspondientes a los 3 pacientes con el nombre o número del paciente.

·         No utilice tarjetas que presenten signos de desecación o burbujas o cuyos cierres no estén intactos.

·         Dispense 50ul de Células I Y II

·         Dispense 25ul de plasma o suero del paciente.

·         Incubar entre 10 y 15 minutos a 37­⁰ C

·         Centrifugar 10 minutos

·         Leer interpretar reacción de aglutinación (Banjo). 

·      Una reacción negativa indica la ausencia de anticuerpos irregulares detectables en el suero o plasma del paciente. Un resultado positivo la presencia de estos. Recuerde, de obtener doble población, incube muestra por 15 minutos a 37 ºC, re centrifugue la muestra y vuelva a realizar el montaje para evitar interferencia de fibrina en el resultado.

·         Realice su interpretación y realice identificación de Anticuerpos irregulares.

Identificación de anticuerpos inesperados

Para la identificación de anticuerpos se deben tomar en cuenta las características de la reacción de dicho anticuerpo. Si se comporta como un anticuerpo caliente o como un anticuerpo frío.

 Reactivos e insumos:

·         Tarjeta/ID-Card Liss coombs (AGH poliespecífica. Coombs Anti-IgG+C3d)

·         Puntas

·         Pipetas 

·         Células de escrutinio: ID DiaPanel Células 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11.

·         Muestra de paciente en tubo seco o tapa lila (EDTA, CPD-A O heparina).

·         Centrifuga

·         Incubadora

·         Banjo

Procedimiento:

·         Maque dos Tarjeta/ID-Card Liss coombs (AGH poliespecífica. Coombs Anti-IgG+C3d) para un paciente.

·         Pipetee 50ul de cada tipo de eritrocitos: ID DiaPanel en los microtubos correspondientes (marcados del 1 al 11)

·         Pipetee 50 ul de dilución al 1% con solución Liss de hematíes del paciente al microtubo 12. (autocontrol)

·         Añada 25ul de plasma o suero del paciente a cada uno de los 12 micro pozos.

·         Recuerde si obtiene resultados no interpretables, proceda a realizar identificación de Ac irregulares con enzima Bromelina, en tarjetas NaCl, recuerde el procedimiento es el mismo que la identificación en tarjetas Liss coombs, solo debe agregar 25 ul de Bromelina a cada pozo.

·         Incube tarjeta por 15 minutos a 37⁰ C en el ID incubator

·         Centrifugue la tarjeta por 10 minutos en el ID centrifuge

·         Lea y registre los resultados en hoja de interpretación, verifique que corresponde a ID panel utilizado.

·         Interprete resultados e identifique anticuerpo de no ser posible su interpretación, evalúe necesidad de realizar montaje con diluyente 1 (Bromelina).

Taller del Laboratorio #3 – MTI Eje 2.

1. En medicina de la transfusión ¿En qué consiste la TRALI?

Este término, TRALI (tranfusion related acute lung injury / Lesión pulmonar producida por transfusión) hace referencia a un síndrome clínico, en el cual se presenta como una hipoxemia aguda o edema pulmonar no cardiogénico (estado de hipoperfusión tisular severo, en el cual el corazón no es capaz de mantener un gasto cardiaco adecuado para las demandas metabólicas tisulares) durante o después de una transfusión de componentes sanguíneos.

Muchos son los criterios propuestos sobre TRALI. El más reciente fue propuesto por Marik y Corwin, quienes ampliaron la definición de la TRALI en función del periodo de comienzo del cuadro clínico.

Tabla 1. Criterios para la definición de Lesión pulmonar aguda -LPA- producida por transfusión (Tomado de: Lesión pulmonar aguda producida por transfusión de J. M. Añon. Tabla 3)

2. ¿Cuáles son las nomenclaturas utilizadas para el sistema Rh?

Primero debemos entender cuáles son los antígenos o que es el sistema Rh. En la mayoría de los casos, sería suficiente (clínicamente) dividir a los sujetos en Rh-positivos y en Rh-negativos; esta distinción logra con el estudio de los eritrocitos mediante el anticuerpo anti-Rh más frecuente, conocido como anti-D (nomenclatura Fisher), y como anti-Rh₀ (según la de Wiener). Este anticuerpo permite clasificar la población en Rh-positivos y en Rh-negativos. Al emplear los términos de anticuerpo Rh o anti-Rh sin mayor especificación, habitualmente se refiere al anti-D (Rh₀).

Se tienen 3 nomenclaturas diferentes para designar el sistema Rh. De estas 3, 2 surgen de las teorías que explican el control genético de la síntesis de los antígenos del sistema Rh.

I.             Fisher-Race (CDE). Propuso un modelo por el cual la síntesis de los antígenos es guiada por 3 pares de genes alelos ubicados en 3 locus unidos en el cromosoma; por esta unión es casi imposible el entrecruzamiento y así, los genes se hereden como complejo genético.

II.            Wiener (Rh-Hr). Aquí, la síntesis de los antígenos del sistema Rh se determina por la presencia de un gen, induciendo la producción de aglutinógeno sobre la superficie eritrocitaria.

III.          Rosenfield y col. (Numérica). Su propuesta está basada en la presencia o ausencia de los antígenos en el eritrocito. Esta nomenclatura no presenta información genética, más bien es el comportamiento serológico de los eritrocitos frente a los antisueros específicos.

Tabla 2. Algunos antígenos Rh en 3 nomenclaturas diferentes. (Tomado de: Transfusión de sangre en medicina clínica de P.L. Mollison. Tabla 8.2)

3. ¿Características del grupo sanguíneo Kell?

El sistema Kell se compone de 35 antígenos, de los cuales 6 conjuntos de antígenos poseen relaciones antitéticas.  Entre los más importantes está el antígeno Kell (K⁺ o K1) y Cellano (k o K2), aunque otros anticuerpos del sistema Kell también son importantes en términos clínicos. Localizados en la superficie eritrocitaria humana y están complemente desarrollados al nacimiento y sus antígenos son muy inmunógenicos, por lo que les confiere el tercer lugar en importancia clínica. Se ubican en la glicoproteína Kell, que pertenece a la familia de las glicoproteínas transmembrana tipo 2, estando muy ligadas a la proteína XK (que contiene el antígeno Kx) por el único puente disulfuro entre el aminoácido 72 de la proteína Kell y el aminoácido 237 de la proteína XK, formando un complejo funcional. La ausencia de la proteína XK (por deleción) conlleva a una marcada reducción de la expresión de los antigenos Kell en la superficie eritrocitaria. El gen KEl es altamente polimórfico y heredado de forma mendeliana con codominancia.

Los anticuerpos del sistema Kell ocupan el tercer lugar en frecuencia de detección en los s bancos de sangre, son del tipo IgG, subclase IgG1 y ocasionalmente fijan complemento; en menor frecuencia son del tipo IgM. Anti-K y anti-k son capaces de causar reacciones graves, tales como: Reacción hemolítica postransfusional o EHRN.

4. ¿Por qué en la Prueba de Coombs indirecto se realiza incubación de las muestras, no realizado en la Coombs directa?

En el caso de la Coombs indirecta, como se estará utilizando suero, este presentara los anticuerpos libres y para que estos logren interactuar con los antígenos de las células (las cuales son de kit’s comerciales) se deben colocar a incubar para garantizar la reacción antígeno-anticuerpo (incubación de 10-15 minutos a 37ºC). contrario en el caso de la prueba Coombs directo, en la cual se utilizan eritrocitos del paciente, y sobre estos ya está la reacción antígeno-anticuerpos, realizado in vivo.

5. ¿Cuál es el fundamento y características de la Prueba Cruzada Mayor?

La prueba de compatibilidad en un ensayo in vitro de lo que puede sucederle al paciente al recibir la transfusión de un componente sanguíneo, por lo que es de suma importancia, permitiendo detectar antígenos y anticuerpos para su estudio en el laboratorio, como también en prevenir las transfusiones de sangre incompatible y proveer al paciente el máximo de seguridad y beneficio.

En el caso de las pruebas cruzadas, estas se realizan en 4 fases: Lectura rápida, lectura de 37º, lectura de 37º / Coombs, validación con eritrocitos sensibilizados. El medio que rodea la prueba está muy relacionado con los potenciadores y con la fuerza iónica que favorece la reacción antígeno-anticuerpo, por lo que debe detectar anticuerpos calientes como fríos y diferenciar entre reacción positivas verdaderas o falsas.

Consta de 3 partes: 

I.             Prueba Mayor (D) o del donador:

a)    Sirve para confirmar si existe compatibilidad ABO entre el receptor y el donador.

b)    Detecta anticuerpos en el paciente (suero) que no se hallaran en la prueba de tamizaje (el antígeno no estaría presente en las células detectoras o eritrocitos de fenotipo conocido)

II.            Prueba menor (R) o del RECEPTOR.

a)    Detecta anticuerpos irregulares en el suero del donador y ratifica algún error de clasificación ABO / Rh.

III.          Prueba autotestigo (AT). 

a)    Permite detectar una prueba de Coombs directa positiva, así como la presencia de rouleaux y otras anormalidades autoinmunes (AHAI).

Las interpretaciones de la detección de anticuerpos como de las pruebas cruzadas:

     I.        Anticuerpos negativos y prueba cruzada compatible. Una detección de anticuerpos negativa no garantiza que el suero se encuentre libre de anticuerpos eritrocitarios clínicamente significativos, solo indica que no los contiene reactivos. Tampoco una prueba cruzada compatible indica una supervivencia eritrocitaria normal, por ello debe realizarse conjuntamente un tamizaje para anticuerpos, o diferentes técnicas tanto para anticuerpos como pruebas cruzadas.

    II.        Detección de anticuerpos, las pruebas cruzadas o ambas pueden ser positivas. Lo anterior puede deberse a la presencia de aloanticuerpos, autoanticuerpos, interacción adversa con reactivos o formación de rouleaux. Si hay múltiples anticuerpos o un anticuerpo que reacción con un antígeno de alta incidencia o si el anticuerpo está en concentraciones muy bajas, deben usarse técnicas específicas como: Elusión, absorción o la combinación de ambas.

  III.        Prueba cruzada incompatible, anticuerpos irregulares negativos. Se presentarían cuando la concentración del anticuerpo es muy baja o solo se detecta con células frescas, también ocurre cuando las células del panel de eritrocitos de fenotipo conocido no tienen el antígeno de la población en estudio.

6. ¿Cuál es la característica del Rastreo de Anticuerpos Irregulares (RAI)?

Los anticuerpos regulares son aquellos que se identifican a los que existen en todos los individuos y que los tendrán durante toda su vida. Los anticuerpos irregulares son los que no están de esa manera, aunque en el caso de los naturales no se conoce a ciencia cierta qué o cómo se induce su producción. La prueba consiste en el rastro que permite identificar a los pacientes que presentan en su suero anticuerpos antieritrocitarios dirigidos contra antígenos que no son del sistema ABO.

Este rastro debe realizarse a todas las unidades recolectadas y receptores de sangre o componentes, buscando anticuerpos irregulares de significancia clínica. Su detección en donantes previene su transferencia pasiva al receptor, pues la detección origina la eliminación de los componentes plasmáticos; en los receptores como prueba pre transfusional aporta mayor seguridad a la transfusión pues el hallazgo de anticuerpos irregulares obliga a la identificación del anticuerpo y buscar unidades que no contengan el antígeno correspondiente, independiente del resultado de la prueba cruzada mayor.

7. ¿Cuáles son pruebas de compatibilidad sanguínea contempladas en la legislación del País?

En el Decreto 1571 de 1993 del Ministerio de Salud colombiano, en su Capítulo IV, Articulo 42: Los bancos de sangre están obligados en practicar bajo su responsabilidad a todas y cada una de las unidades recolectadas de las siguientes pruebas:

I.       Determinación de grupo ABO (Detección de antígenos y anticuerpos).

II.      Determinación del factor Rh (antígeno D) y variante Du, en los casos meritorios.

En el caso de las pruebas de Rastreo de Anticuerpos irregulares, identificación de anticuerpos irregulares, estas se realizarán en los Bancos de Sangre de categoría A (Capitulo II, Articulo 14).

También contemplados en el Manual de normas técnicas, administrativas y de procedimientos en Bancos de Sangre del Ministerio de Salud, en su Capítulo 5 “Investigaciones en la sangre del donante.”: Determinación del grupo ABO (Prueba globular / directa y la Prueba sérica / inversa), Determinación del antígeno Rh y Pruebas para anticuerpos irregulares / inesperados. En el Capítulo 7 del mismo manual “Transfusión sanguínea” nos dice que pruebas realizar para el receptor, Pruebas de compatibilidad: Hemoclasificación, determinación del ABO/Rh, rastreo de anticuerpos inesperados en el receptor y la prueba cruzada mayor.